一、提高基因表达水平的含义?
基因的表达水平(转录及翻译)水平 上调。
二、如何确定蛋白编码基因的表达水平?
1蛋白电泳+蛋白杂交,与marker比较;
2qRT—PCR,与参比内参基因比较mRNA转录水平。
三、为何要采用融合表达方式表达外源基因?
1.确保外源基因正确有效表达,2.对外源基因表达实施有效调控,如胞内表达,分泌表达等,3. 提高外源基因表达水平4.增加外源基因表达产物的溶解度与活性,减少包涵体的形成;
四、为什么要采用融合表达方式表达外源基因?
采用整合方式表达就是外源基因随染色体复制进行整合型表达,稳定性高,不会随酵母的增殖而丢失;反之,如果是酵母染色体之外的质粒,就很可能会随着酵母的复制而逐渐丢失了.
五、克隆基因表达基因的区别?
一、原理不同1、克隆载体:采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的 外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。2、表达载体:在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。二、要求不同1、克隆载体:能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力;容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好;容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才便于重组操作。2、表达载体:常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为黏性末端,也有平末端),采用DNA连接酶连接,导入生物体实现表达。三、组成部分不同1、克隆载体:病毒、质粒或高等生物细胞。2、表达载体:目的基因、启动子、终止子、标记基因。
六、基因表达的条件?
基因的选择性表达是指在细胞分化中,基因在特定的时间和空间条件下有选择表达的现象,其结果是形成了形态结构和生理功能不同的细胞。基因的选择性表达的条件如下: 生物体内有一套RNA监视系统,可以通过多种异常RNA来激发。如果外来核酸是DNA(包括转基因、重组基因、DNA病毒、扩增子等),靶标RNA需要在细胞核中完全成转录后运转到细胞质中,而侵入细胞质的病毒RNA可以直接提供靶标RNA。
七、基因表达的意义?
基因表达是指将基因中的遗传信息转化为生物分子的过程,包括转录和翻译两个步骤。它具有以下几个重要的意义:维持生命活动:基因表达是细胞维持正常生命活动的基础,通过转录和翻译产生的蛋白质和 RNA 分子参与了细胞代谢、信号转导、免疫防御等多种生命过程。控制细胞分化和发育:在胚胎发育过程中,不同的基因在不同的时间和空间被表达,从而控制细胞的分化和发育。适应环境变化:细胞可以通过调节基因表达来适应环境变化,例如在应激条件下,细胞会增加特定基因的表达,以应对环境压力。遗传信息传递:基因表达是遗传信息传递的重要环节,通过基因表达产生的蛋白质和 RNA 分子可以传递遗传信息给后代细胞。综上所述,基因表达对于维持生命活动、控制细胞分化和发育、适应环境变化以及遗传信息传递等方面都具有重要的意义。
八、18何谓基因表态?简述真核生物的五个水平的基因表达调节?
生物体在个体发育的不同时期、不同部位,通过基因水平、转录水平等的调控,表达基因组中不同的部分,其结果是完成细胞分化和个体发育。
基因的选择性表达是指在细胞分化中,基因在特定的时间和空间条件下有选择表达的现象,其结果是形成了形态结构和生理功能不同的细胞。
九、基因芯片的原理?
基于核酸分子碱基间(A-T/C-G)互补配对原理,利用分子生物学、基因组学、信息技术、微电子、精密机械和光电子等技术将基因或DNA分子排列在特定固体物表面构成微点阵。
然后将标记的样品分子与微点阵上的DNA杂交,以实现多达数万个分子之间的杂交反应,高通量大规模地分析检测样品中多个基因的表达或者特定基因分子是否存在的目的。
十、基因芯片的应用?
基因芯片利用微电子、微机械、生物化学、分子生物学、新型材料、计算机和统计学等多学科的先进技术,实现了在生命科学研究中样品处理、检测和分析过程的连续化、集成化和微型化,为生命科学研究、医学、药物研究与开发、法医鉴定、工农业以及食品与环境卫生监督等领域乃至整个人类社会带来广泛而深刻的变革。